【概述】

常规体外受精中精子与卵细胞共孵育的方式主要有两种：传统隔夜受精和短时受精。隔夜受精即将精卵共培养16～20小时。卵子与非生理性高浓度精子长时间的共培养，可能不利于胚胎的发育。缩短精子与卵母细胞共培养时间至2～6小时，一般为4小时，称之为短时受精。短时受精的优点，首先是避免了卵子与非生理性高浓度精子的长时间共培养；二是短时受精结合早期补救技术的应用可减少因常规IVF受精失败而周期取消的比例；三是短时受精结合早期补救技术，可获得早期卵子成熟度评估，相比传统隔夜受精卵子成熟度的评估，对临床控制性促排卵方案的实施更具有参考和指导意义。短时受精时早期拆除颗粒细胞是否增加异常受精率，研究尚无一致结论，目前尚无增加异常风险的报道，但其长远的影响仍需关注。

【适应证】

所有行常规IVF的周期。

【术前准备】

1.提前打开工作站风机，体视显微镜及恒温热板。

2.确认热板温度显示正常。

3.准备不同口径的剥卵针/管（200μm、170μm、150μm）数支。

【操作程序】

1.精卵共培养4小时后，从培养箱取出受精皿，置于恒温热板。

2.调节显微镜，至镜下可清晰见受精液滴中的卵母细胞复合体。

3.用剥卵针（口径170μm）将卵子从受精液滴中移出，移至未加精的液体中。

4.待所有卵子转移结束，直接将培养皿放回原培养箱继续培养即可。如做早期拆除颗粒细胞，则跳过3、4步骤，进入第5步骤。

5.体视显微镜下用口径170μm左右的剥卵针反复轻柔吹打卵母细胞复合体。

6.调节体视显微镜放大倍数，并用剥卵针反复吹吸卵母细胞使其转动，以便观察卵母细胞透明带下极体数目。

7.如卵母细胞外颗粒细胞去除情况仍不足以观察到极体数目，可换小口径的剥卵针（150μm）继续轻柔吹打卵母细胞，至镜下可辨识极体数目为止。

8.将明显可见2个极体的卵子移出受精滴至未加精的液滴中，明确仅见一个极体或是未成熟卵子可继续留在受精滴。

9.转移结束，将培养皿放回原培养箱继续培养。

10.是否行补救ICSI的判断，参见第五章第七节补救卵胞浆内单精子显微注射。

【注意事项】

在转移和拆除卵子颗粒细胞过程中，如发现所用剥卵针口径过小，应立即更换较大口径的剥卵针，以免过大机械压力造成卵子损伤。